產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。 產(chǎn)品名稱:高致病性禽流感H7亞型病毒核酸試劑盒 規(guī)格:48T/盒 編號:HE32199-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 水中靛藍溶液標準樣品 5ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒PCR試劑盒 烯草酮溶液標準樣品 1ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 酰菌胺溶液標準樣品 1ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 精甲霜靈溶液標準樣品 1ml Avian Adenovirus禽腺病毒PCR試劑盒 嘧菌環(huán)胺溶液標準樣品 1ml Avian Adenovirus禽腺病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 增效醚溶液標準樣品 1ml Avian Adenovirus禽腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 氯吡脲溶液標準樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒RT-PCR試劑盒 啶酰菌胺溶液標準樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 戊菌唑溶液標準樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 噻蟲啉溶液標準樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽戊型肝炎病毒RT-PCR試劑盒 喹螨醚溶液標準樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽戊型肝炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 氧威溶液標準樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽戊型肝炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 唑螨酯溶液標準樣品 1ml Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽皰疹病毒1型PCR試劑盒 虱螨脲溶液標準樣品 1ml Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽皰疹病毒1型染料法熒光定量PCR試劑盒 噻蟲胺溶液標準樣品 1ml Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 維生素B5/D-泛酸鈣/本多生酸鈣/(R)-N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基-1-氧代丁基)-β-丙氨酸鈣/N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基丁酰)-β-氨基丙酸鈣/右旋泛酸鈣/VB5BR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,137-08-6RT,避光 100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 1公斤,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名稱: 維生素B5 其他名稱: D-泛酸鈣;本多生酸鈣;(R)-N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基-1-氧代丁基)-β-丙氨酸鈣;N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基丁酰)-β-氨基丙酸鈣;右旋泛酸鈣 英文名稱: VB5 其他名稱: D-calcium pantothena;Vitamin B5;Pantothenic acid calcium salt;D-(+)-Pantothenic acid calcium 產(chǎn)品規(guī)格: BR,99% 包裝:25克/100克/250克 CAS號:137-08-6 C18H32CaN2O10=476.54 級別:BR 含量:≥99.0% 比旋光度:+25.5~+27.5° 氮含量:5.7~6.0% 鈣含量:8.2~8.6% 重金屬:≤10 ppm 干燥失重:≤5.0% 性狀:針狀結晶或粉末。味稍甜而后微苦,有吸濕性,對光敏感。溶于水、甘油和堿溶液,微溶于乙醇和丙酮,不溶于。5%水溶液pH7.2~8.0,在無二氧化碳的水中為8.7。熔點 195~196℃(分解) 用途:生化研究。配制組織培養(yǎng)基。營養(yǎng)劑 保存:RT,避光 高致病性禽流感H7亞型病毒核酸試劑盒雞可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit,48T/96T 用途: 教學科研 人可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Plantactinospora mayteni 小鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Penicillium chrysogenum 兔子可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Bacillus megaterium 雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA Kit,48T/96T用途: 表達載體 人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Bacillus sp. 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glu)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Enterococcus faecalis 反應五要素: 參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |