產(chǎn)品名稱(chēng)：土壤過(guò)氧化物酶(S-POD)試劑盒說(shuō)明書(shū)

規(guī)格：48樣、96樣、

貨號(hào)：GOY-016401

檢測(cè)方法：可見(jiàn)分光光度法、微板法

產(chǎn)品分類(lèi)：土壤系列

公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月

【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù)

溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

儀        器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b

置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

試            劑:乙腈、中性氧化鋁

測(cè)定步驟：

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。

5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

LY-96/MD-2/ESOP-1/FITC  熒光標(biāo)記MD-2抗體IgG蝰蛇(Viperin)ELISA試劑盒

Lysozyme/FITC  熒光標(biāo)記溶菌抗體IgG喹啉核糖基轉(zhuǎn)移(QPRT)ELISA試劑盒

Phospho-Lyn (Tyr507) /FITC  熒光標(biāo)記膜相關(guān)酪氨激Lyn抗體IgG快肌肌鈣C(TNNC2)ELISA試劑盒

Phospho-Lyn (Tyr396) /FITC  熒光標(biāo)記化膜相關(guān)酪氨激Lyn抗體IgG跨膜絲氨6(TMPRSS6)ELISA試劑盒

Phospho-Lyn (Tyr497) /FITC  熒光標(biāo)記化膜相關(guān)酪氨激Lyn抗體IgG跨膜絲氨4(TMPRSS4)ELISA試劑盒

LYVE-1/FITC  熒光標(biāo)記淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)受體抗體跨膜絲氨2(TMPRSS2)ELISA試劑盒

M2-PK /FITC  熒光標(biāo)記激-M2抗體IgG跨膜5(TMEM5)ELISA試劑盒

M2-PK /FITC  熒光標(biāo)記激-M2（小鼠來(lái)源抗體）IgG跨膜2樣(TMEM2L)ELISA試劑盒

Phospho-PKM2 (Tyr105) /FITC  熒光標(biāo)記化激M2抗體IgG跨膜27(TMEM27)ELISA試劑盒

Mad1/FITC  熒光標(biāo)記Mad1抗體IgG跨膜2(TMEM2)ELISA試劑盒

MAdCAM-1/FITC  熒光標(biāo)記粘膜血管定居因子抗體IgG跨膜1(TMEM1)ELISA試劑盒

MAdCAM-1/Biotin  生物標(biāo)記粘膜血管定居因子抗體IgG跨膜4域亞家族A成員1(MS4A1)ELISA試劑盒

Mafa/FITC  熒光標(biāo)記v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體（）IgG扣帶(CGN)ELISA試劑盒

MAFbx/Fbx32/Atrogin-1/FITC  熒光標(biāo)記泛連接抗體IgG克拉拉16(CC16)ELISA試劑盒

MAG-a/L-MAG /FITC  熒光標(biāo)記髓鞘相關(guān)糖-a抗體IgG可溶性半乳糖凝集3結(jié)合(LGALS3BP)ELISA試劑盒組織PKA激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次三

細(xì)胞Src激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次仲辛

組織Src激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次安息香

細(xì)胞PKC激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次酞

組織PKC激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次正壬

細(xì)胞AMPK激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次脫水

組織AMPK激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次香附

細(xì)胞B-RAF激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次厚樸

組織B-RAF激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次隔山消

細(xì)胞C-TAK激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次大果木姜子

組織C-TAK激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次艾葉

細(xì)胞CaM KII激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次盾葉薯蕷

組織CaM KII激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次巴龍霉

細(xì)胞CaM KIV激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次尿嘧

組織CaM KIV激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）20次雙
土壤過(guò)氧化物酶(S-POD)試劑盒說(shuō)明書(shū)抗5b檢測(cè)試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域94抗體

甲狀旁腺激134檢測(cè)試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域82抗體

氨基端前心鈉肽檢測(cè)試劑盒CDK5激活結(jié)合2抗體

含卷曲螺旋域49檢測(cè)試劑盒CDK2相互作用抗體

脫氫檢測(cè)試劑盒周期依賴(lài)性激14抗體

硫吲哚酚檢測(cè)試劑盒癌胚抗原相關(guān)粘附分子19抗體

同型半胱檢測(cè)試劑盒先天性紅生成異常性貧血1抗體

3-羧基-4-甲基-5-基-2呋喃檢測(cè)試劑盒癌胚抗原相關(guān)粘附分子16抗體

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。