產(chǎn)品名稱:α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)試劑盒規(guī)格 規(guī)格:24樣、48樣、 貨號:GOY-016575 檢測方法:可見分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:細(xì)胞壁代謝系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。 TRBF1 (omeric repeat binding factor 1) 端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗原 TRIM32(tripartite motif protein 32) TRIM32抗原 Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球抗原 TSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4) 生精凋亡相關(guān)基因4抗原 TSGF(Tumor Specific Growth Fanctor) 惡性腫瘤特異性生長因子抗原 CIDEB peptide CIDEB抗原 Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) Tsg101抗原 TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor) 促甲狀腺受體抗原 MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相關(guān)輕鏈3抗原 TSLC1 (tumor suppressor in lung cancer-1) 肺癌腫瘤阻抑基因1抗原 TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) 甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗原 Tubulin- Gamma 微管-γ抗原 TWIST protein peptide TWIST抗原 T Beta10 peptide β10抗原 UCN(Urocortin)mouse ret 新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠)定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒牛型放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 牛毒性腹瀉毒(Bovine Viral Diarrhoea Virus;BVDV)2次E型探針法熒光定量PCR試劑盒 標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒馬節(jié)桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 通用型牛毒性腹瀉毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定性因檢測試劑盒20次異尖線蟲屬探針法熒光定量PCR試劑盒 細(xì)胞牛毒性腹瀉毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定性因檢測試劑盒20次通用探針法熒光定量PCR試劑盒 組織牛毒性腹瀉毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定性因檢測試劑盒20次化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 血牛毒性腹瀉毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定性因檢測試劑盒20次溫和氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒 體牛毒性腹瀉毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定性因檢測試劑盒20次無色桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 通用型牛毒性腹瀉毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次禽類支原體通用探針法熒光定量PCR試劑盒 細(xì)胞牛毒性腹瀉毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次馬隱秘桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 組織牛毒性腹瀉毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次鳥類多瘤探針法熒光定量PCR試劑盒 血牛毒性腹瀉毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次構(gòu)巢曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒 體牛毒性腹瀉毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次寄生曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒 牛毒性腹瀉毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)2次地衣形芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒皰疹探針法熒光定量PCR試劑盒 α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)試劑盒規(guī)格嵌合2檢測試劑盒染色體區(qū)域穩(wěn)定/核輸出1抗體 基質(zhì)淋巴生成檢測試劑盒化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 核糖核A4檢測試劑盒ETS相關(guān)71抗體 卵黃原檢測試劑盒外胚層發(fā)育不良1抗體 肌動檢測試劑盒ETV3L抗體 SARSIgM抗體檢測試劑盒酪氨激受體B6抗體 凋亡調(diào)節(jié)因子檢測試劑盒溶血脂受體1抗體 吡咯啉-5-羧合成檢測試劑盒溶血脂受體2抗體 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。
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