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霍氏腸桿菌說明書

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更新日期:
2021-11-08
點(diǎn)擊次數(shù):
1285
產(chǎn)品特點(diǎn):
霍氏腸桿菌說明書是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級(jí)種)、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
  霍氏腸桿菌說明書的詳細(xì)資料:

產(chǎn)品名稱:霍氏腸桿菌
貨號(hào):YS-01J12492
拉丁文: Enterobacter│hormaechei

分離基物: 蕈菌

提供形式: 凍干物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 33

生長條件: 37℃

存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

霍氏腸桿菌說明書

Enterobacter│hormaechei 

YS-01J12492

公司產(chǎn)品僅用于科研培養(yǎng)及打管說明:

1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。圖片3.png

保存方法:

傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 。

液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法:

① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法:

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。圖片4.png

微生物菌種的培養(yǎng):

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。

⑵ 霉菌孢子的制備 

霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備 

搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級(jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

人游離睪酮(F-TESTO)前列環(huán)素合成酶抗體

人游離蛋白S(FP-S)軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體

人游離雌三(FE3)T淋巴CD1A抗體

人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)磷酸化周期素B1抗體

人幽門螺旋菌抗體(IgA)胞漿型磷脂酶A2抗體

人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白抗體

人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)緊密連接蛋白6抗體

人硬骨素(SOST)磷酸化緊密連接蛋白6抗體

人印度猬因子(IHH) 著絲粒蛋白T抗體

人隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)染色體相關(guān)蛋白2抗體

人吲哚2,3-雙加氧酶(IDO)著絲粒蛋白P抗體

人吲哚(INDO)自身抗體分裂周期相關(guān)蛋白5抗體

人音猬因子N端(Shh-N)染色體相關(guān)蛋白2抗體

人音猬因子(SHH)周期調(diào)控因子10抗體

人抑制素β-B(Inhbb)中心體蛋白97kDa抗體
霍氏腸桿菌說明書德夸菌素鏈霉菌磷酸化Bcl-xL蛋白抗體 (-)-Hyoscyamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

禾谷絲核菌高表達(dá)神經(jīng)上皮蛋白BTG3抗體 Dextran D70 質(zhì)量規(guī)格:Mw:63000~77000,USP32

兩型蠟蚧菌B遷移基因4抗體 Dextran D40 質(zhì)量規(guī)格:Mw35 000 to 45 000

葡萄牙棒孢酵母BCL2相互作用蛋白質(zhì)抗體 Dextran D20 質(zhì)量規(guī)格:MW:16000~24000

禾谷絲核菌大腦蛋白2抗體 Saxagliptin HCL 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

伊平屋橋大洋芽孢桿菌B轉(zhuǎn)錄激活因子抗體 EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract 質(zhì)量規(guī)格:茶多酚≥98%,EGCG≥95%,≤0.1%

白僵菌BCL6B抗體 Dasatinib Monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)

交鏈孢霉BAP31蛋白抗體 Exemestane (USP) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,Aromatase inhibitor
微生物培養(yǎng)方法:

1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。

2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。

上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:

a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。

b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。

c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。

 


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