產(chǎn)品名稱:牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Akabane Disease Virus(ADV)RTPCR 編號:HE30596-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 熱休克蛋白22試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>65IU/MG,BR 包裝;25g 熱穩(wěn)定抗原試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP31 包裝;500g 缺血修飾白蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP 6.4,BR 包裝;100g 犬尿氨酸試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 醛脫氫酶7家族,成員A1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥99,BR 包裝;1g 醛糖還原酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 醛縮酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>900μg/mg, USP,BR 包裝;1g 醛固酮試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定 包裝;250mg 去乙?;窼irtuin-7試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 去乙?;窼irtuin-6試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 去乙?;窼irtuin-5試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100ml 去乙?;窼irtuin-4試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:總含量>95% ,進(jìn)分 包裝;25ml 去乙?;窼irtuin-2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%;NK1受體拮抗劑 包裝;100ml 去乙酰化酶Sirtuin-1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25ml 去乙?;囸I激素試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 去唾液酸糖蛋白受體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;25g 去唾液酸糖蛋白受體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 Neisseria meningitidis 中文名稱:腦膜炎奈瑟菌種屬:Neisseria meningitidis分離基物:腦膜炎患者的脊髓液提供形式:凍干管,斜面培養(yǎng)物安全等級:2模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:Media testing培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:蛋白胨10g,葡萄糖2g ,NaCl 5g, NaH2PO4 2.5g, 檸檬酸鈉)5g, 腦浸汁)800ml, 豬心浸液 200ml, 羊血10%, pH 7.2 [注]豬心和豬腦浸汁法:(1)新鮮豬心除去心頭和脂肪,攪碎100克加蒸餾至1000毫升;(2)新鮮豬腦除去血管,取200克加蒸餾至1000毫升;(3)50℃保溫1小時(shí),然后煮開15分鐘;(4)冷卻后用紗布過濾備用。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:37℃,5%CO2存儲條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個月。 純度:>98.0%(T),升華提純 Streptomycesalbussubsp.albu 中文名稱:白色鏈霉菌白色亞種種屬:Streptomycesalbussubsp.albu安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:158生長條件:28℃ 純度:>98.0%(T),升華提純 Lentzeasp 中文名稱:Lentzeasp種屬:Lentzeasp分離基物:泥安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)抗生素。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:155生長條件:28℃ 純度:98% Streptomycesclavuligerus 中文名稱:帶小棒鏈霉菌種屬:Streptomycesclavuligerus分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:;基因組序列號:ABJH00000000,CM000913,CM001015;細(xì)胞提取物能夠通過環(huán)化作用將苯乙酰-L-半胱氨酰-D-纈氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)槠S青霉素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:158生長條件:28℃ 純度:97% Streptomycesscabiei 中文名稱:Streptomycesscabiei種屬:Streptomycesscabiei分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:70生長條件:28℃ 純度:97% Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium 中文名稱:腸沙門氏菌腸亞種鼠傷寒血清型種屬:Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制。研究、質(zhì)量控制,《GB 4789.28 培養(yǎng)基:和試劑的質(zhì)量要求》標(biāo)準(zhǔn)菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:37℃,好氧生長特性G-桿菌,精氨酸雙解酶陰性,賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶陽性,氧化酶、尿素酶陰性,吲哚陰性,檸檬酸鹽實(shí)驗(yàn)陰性,不發(fā)酵蔗糖、肌醇,有動力、產(chǎn)生H2S,兼性厭氧,適pH7.4~7.6。血清型:O 4,5,12 : H i : 1,2 。存儲條件:2-8℃。真空冷凍干燥法 純度:97% Brevibacterium│flavum 中文名稱:黃短桿菌種屬:Brevibacterium│flavum提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)蘇氨酸。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:97% Enterobacter│gergoviae 中文名稱:日溝維腸桿菌種屬:Enterobacter│gergoviae提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:98 atom % D |